熒光定量PCR技術

簡要描述：熒光定量PCR技術于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，由于該技術不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前已得到廣泛應用

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熒光定量PCR技術TaqMan探針的特性：

（1）5′端標記有報告基團（Reporter, R），如FAM、VIC等

（2）3′端標記有熒光淬滅基團（Quencher, Q）

（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收，無熒光， R與Q分開，發(fā)熒光（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針。

熒光定量PCR技術定量的標準樣品：

（1）含有和待測樣品相同擴增片段的克隆質粒

（2）含有和待測樣品相同擴增片段的cDNA

（3）PCR的產物，可分別做系列稀釋。

服務流程：

步驟	客戶提供	服務內容	基屹提供
1	新鮮的且盡量多的材料；已知的全長基因序列；盡可能詳細的背景資料：DNA/ RNA來源、豐度等。	DNA/RNA提取，根據(jù)基因序列設計特異性的引物和熒光探針。
2	純化好的DNA/RNA（大于5 ug/樣品）；已知的全長基因序列；盡可能詳細的背景資料：DNA/ RNA來源、豐度等。	根據(jù)基因序列設計特異性的引物和熒光探針。
3		以DNA為模板，對目的基因進行熒光定量PCR檢測分析	提供完整的定量分析結果、實驗熒光定量擴增曲線及詳細的實驗步驟。