簡(jiǎn)要描述:CRISPR-Cas9基因敲除小鼠,通過(guò)體外轉(zhuǎn)錄,獲得編碼Cas9酶與SgRNA,然后通過(guò)受精卵顯微注射,獲得基因敲除小鼠模型, 為快速制備基因敲除小鼠開(kāi)辟了新的技術(shù)途徑。
CRISPR-Cas9基因敲除小鼠,通過(guò)體外轉(zhuǎn)錄,獲得編碼Cas9酶與SgRNA,然后通過(guò)受精卵顯微注射,獲得基因敲除小鼠模型, 為快速制備基因敲除小鼠開(kāi)辟了新的技術(shù)途徑。
基屹生物可以根據(jù)客戶的需求設(shè)計(jì)高效特異的3-5條Guide RNA,并通過(guò)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)篩選的序列,保證成功率。整個(gè)實(shí)驗(yàn)流程僅需3-5個(gè)月。
CRISPR-Cas9基因敲除小鼠,通過(guò)體外轉(zhuǎn)錄,獲得編碼Cas9酶與SgRNA,然后通過(guò)受精卵顯微注射,獲得基因敲除小鼠模型, 為快速制備基因敲除小鼠開(kāi)辟了新的技術(shù)途徑。
在沒(méi)有外加供體模板DNA的情況下,細(xì)胞在CRISPR-Cas9剪切目的基因后,通過(guò)NHEJ途徑產(chǎn)生移碼突變,從而獲得基因敲除小鼠;在外加供體模板DNA后,細(xì)胞在CRISPR-Cas9剪切目的基因后,通過(guò)HDR途徑將外源DNA序列引入到基因組中,從而獲得基因敲入小鼠或條件型基因敲除小鼠。