透析胎牛血清是否需要做滅活處理?
透析胎牛血清進行培養(yǎng)細胞時,除了血清還需要添加基礎培養(yǎng)基,混合成為*培養(yǎng)基,基礎培養(yǎng)基是成分確定且知其確切含量的,可以補充血清中缺乏的營養(yǎng)元素,基礎培養(yǎng)基一般含有氨基酸、無機鹽、維生素、含碳物質(zhì),蛋白和其他營養(yǎng)元素,每種成分對于細胞存活、代謝等功能都有不同影響,不同細胞系需要的成分含量也不同,因此市面上會存在各類培養(yǎng)基配方,如DMEM,RPMI-1640,M-199,MEM等,基礎培養(yǎng)基也需要根據(jù)自己培養(yǎng)的細胞種類進行更合適的選擇。
自行配制基礎培養(yǎng)基時,需要注意是否需另外添加營養(yǎng)物或必需物至培養(yǎng)基中(如:碳酸氫鈉)并調(diào)整pH值。使用不適合的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞,細胞仍可生長但特性會改變。培養(yǎng)基中常用的酚紅(pH指示劑)本身有微弱雌激素作用,會刺激具有雌激素受器的細胞生長。
透析胎牛血清是在對懷孕八個月的母牛直接進行心臟穿刺取血得出的血清,而小牛血清是在小牛出生后一天之內(nèi)通過靜脈采血所得到的血清。這兩種采集方式是有著根本區(qū)別的,通過采集的方式便可以得知胎牛血清對相關的胎牛質(zhì)量要求更高,因此所提取得血清材質(zhì)效果更好對細胞培養(yǎng)的夠提供更穩(wěn)定的性能。在胎牛血清和小牛血清的提取中所需要的工藝和成本大有不同,因而制作而成的胎牛血清與小牛血清之間的價格也存在著較大的差異。
透析胎牛血清是否需要做滅活處理?這取決于您的應用。
滅活過程中,會導致血清中某些成分被破壞,如氨基酸,維生素,生長因子等。所以只有在您的實驗對血清有特殊要求時,才會考慮對血清進行滅活處理。如您的實驗對血清中的某種組分敏感,需要去除該組分。常見的情況是需要去除血清中的補體蛋白,因為補體在機體中參與細胞殺傷,巨噬細胞和淋巴細胞活化,肥大細胞和血小板組胺釋放,平滑肌收縮等過程,所以一般在免疫學相關研究中及肌細胞和干細胞的培養(yǎng)過程中需要對血清進行滅活處理。