血清沉淀會影響細胞培養(yǎng)嗎?
1.細胞生長
我們在出廠前都會對血清進行一系列質檢測試,確保血清質量達到嚴格標準。血清測試和細胞培養(yǎng)經驗也表明,其沉淀成分不會影響血清作為細胞培養(yǎng)添加物的表現。這一點得到了眾多客戶和其他血清供應商的肯定。解凍之后,血清中纖維蛋白原往往會發(fā)生凝集,形成肉眼可見的沉淀。
2.懷疑污染
磷酸鈣顆粒經常會被當成微生物污染而引發(fā)不必要的擔憂。一般情況下,當操作人員融化血清后注意到有霧狀渾濁時,常將其存放在4℃冰箱中觀察,并考慮接下來是否繼續(xù)使用。但這樣會使沉淀進一步增多,反而會使血清更加渾濁,進而誤以為存在血清污染。并且,在倒置顯微鏡下,可在血清中觀察到四處游動的小黑點(磷酸鈣顆粒的布朗運動),更容易使人誤以為存在微生物污染。
為防止這類誤解的產生,我們不建議客戶培養(yǎng)血清來驗證是否存在污染,而是將血清直接接種在細菌培養(yǎng)基上進行培養(yǎng),以觀察是否有細菌的增殖。并且,進行革蘭氏染色,并在油鏡(100X10倍)下觀察可直接確認是否存在微生物污染。
怎樣操作可以盡量避免沉淀出現?
1.正確解凍
首先,應按照逐步解凍的方式正確解凍血清:從-20℃取出后,置于4℃冰箱緩慢解凍,最后置于室溫完成解凍。如果直接從-20℃拿到室溫或37℃水浴解凍,則非常容易產生沉淀。在解凍過程中,請注意時不時緩慢搖晃瓶子,減少沉淀的產生。為避免反復凍融,建議您將血清分裝使用。
2.使用和保存注意事項
血清沉淀很難預測和避免,出現沉淀后也無需擔憂,這并不會影響血清的品質。已知血清沉淀在以下條件下會有增多的可能:
1)熱滅活;
2)37℃培養(yǎng);
3)反復凍融;
4)伽馬射線照射;
5)2-8℃長期保存;
6)長期保存于可自動化霜的冰箱中(溫度不穩(wěn)定)。
血清沉淀的形成機理多種多樣,具體的機理尚不十分明確。我們尚不能準確預測和控制血清沉淀的產生。目前市面上所有品牌的血清產品都存在沉淀現象,這一點可以在各品牌*網站上關于沉淀問題的聲明上得到證實。