培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng) ?。?、培養(yǎng)基配方的選定
同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別.因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外,一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對(duì),再依據(jù)自己的使用目的,加以選用,記錄其來(lái)源.
2、培養(yǎng)基的制備記錄
每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)基名稱,配方及其來(lái)源,和各種成份的牌號(hào),終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制備的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份,原記錄保存?zhèn)洳?復(fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂.
?。场⑴囵B(yǎng)基成分的稱取
培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯(cuò)亂,好一次完成,不要中斷.可將配方置于傍側(cè),每稱完一種成分即在配方面軍做出記號(hào),并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側(cè),每種稱取完畢后,即移放于右側(cè).*稱取完畢后,還應(yīng)進(jìn)行一次檢查.
?。础⑴囵B(yǎng)基各成份的混合和溶化
培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的.使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細(xì)菌不易生長(zhǎng).好使用不銹鋼鍋加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化.在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng)、以防焦化,如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應(yīng)重新制備.待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分*溶化,直至煮沸.如為瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合.在加熱溶化過(guò)程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,后必須加以補(bǔ)足.
?。怠⑴囵B(yǎng)基pH的初步調(diào)正
因培養(yǎng)基在加熱消毒過(guò)程中、pH會(huì)有所變化,培養(yǎng)基各成分*溶解后,應(yīng)進(jìn)行pH的初步調(diào)正.例如,牛肉浸液約可降低pH 0.2,而腸浸液pH卻會(huì)有顯著的升高.因此,對(duì)這個(gè)步驟,操作者應(yīng)隨時(shí)注意探索經(jīng)驗(yàn)、以期能掌握培養(yǎng)基的終pH,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量.pH調(diào)整后,還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出.